DIN 10054:2015-05

Dieses Dokument beschreibt ein enzymatisch/reflektometrisches Screening-Verfahren (Teststreifennachweis) zur Bestimmung des Gehaltes an L- und D-Milchsäure (L- und D-Lactat) in Milch und Milchprodukten. Der nach diesem Verfahren bestimmte L- und D-Milchsäuregehalt sowie L- und D-Lactatgehalt, wird als L- und D-Milchsäure berechnet. Milchsäure (L- und D-Form) wird durch Nicotinamidadenin-dinucleotid in Gegenwart der Enzyme L-Lactat-Dehydrogenase und D-Lactat-Dehydrogenase zu Brenztraubensäure (Pyruvat) oxidiert. Die in diesen Reaktionen gebildete reduzierte Form des Nicotinamid-Adenin-Dinucleotids reduziert in Gegenwart von Diaphorase ein Tetrazoliumsalz zu einem Formazan. Die Menge des gebildeten Formazans ist der vorhandenen L-Milchsäure beziehungsweise D-Milchsäure proportional. Die Menge des gebildeten Formazans wird reflektometrisch bestimmt. Das Gleichgewicht der Reaktionen, das weitgehend auf der Seite von Milchsäure liegt, wird durch die Reaktion der reduzierten Form des Nicotinamid-Adenin-Dinucleotids mit dem Tetrazoliumsalz auf die Seite von Brenztraubensäure (Pyruvat) und NADH verschoben. Die Enzyme L-Lactat-Dehydrogenase und D-Lactat-Dehydrogenase sind stereospezifisch, sodass die beiden isomeren Milchsäuren nebeneinander bestimmt werden können. Für diese Norm ist das Gremium NA 057-05-13 AA "Milch und Milcherzeugnisse - Probenahme- und Untersuchungsverfahren" bei DIN zuständig.